品牌 | 其他品牌 | 貨號 | HB13531 |
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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,制藥 |
hellobio:Streptavidin AF488 貨號:HB13531
生物學描述 | 鏈霉親和素AF488是與熒光染料AF488綴合的生物素結合蛋白,可用于檢測生物素標記的分子,如核酸、抗體和其他蛋白質。生物素化的抗體通過鏈霉親和素AF488以高的親和力結合,使得能夠在IHC、ICC、流式細胞術和蛋白質印跡中進行免疫熒光檢測。 關鍵特征: - 與AF488共軛(Ex:498納米,Em:525納米)
- 作為更穩定的凍干劑提供
- 用于重復成像的明亮且光穩定的信號
- 適用于IHC(IF)、ICC、蛋白質印跡和流式細胞儀
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描述 | AF488綴合鏈霉親和素,用于生物素偶聯蛋白和抗體的檢測和信號放大。 |
圖一。大鼠海馬內表達小清蛋白和鈣視網膜素的中間神經元。
大鼠海馬染色HB6457
檢測小清蛋白和HB6494
來檢測鈣視網膜素。使用抗小鼠生物素抗體(HB11345
隨后用鏈霉親和素AF488 (HB13531)孵育。方法:將大鼠腦解剖并在4% PFA中固定過夜,然后在30%蔗糖(在PBS中)中孵育直到下沉(大約。48小時)。在切片在1% NaBH4中孵育30分鐘之前,使用冷凍切片機切割40 μm水平切片。切片在0.05M甘氨酸、2% BSA和3%驢血清中封閉,然后在小清蛋白中孵育過夜HB6457(1:1000稀釋)和CalretininHB6494(1∶4000稀釋度)在4℃下。隨后用1∶300稀釋度的二抗山羊抗小鼠生物素抗體孵育2小時HB11345,山羊抗兔Janelia Fluor 549)。在PBST洗滌三次后,切片在室溫下用1.0 L/mL的鏈霉親和素AF488 (HB13531)孵育2小時。DAPIHB0747以1克/毫升的濃度使用以顯現細胞核。欲了解更多詳情,請參閱我們的IHC協議。使用徠卡DMI6000B倒置落射熒光顯微鏡捕獲圖像。使用z-stack中的20x物鏡以tilescan的形式拍攝圖像,曝光時間:A4: 57.803毫秒,GFP: 524.211毫秒,Y3: 524.211毫秒
圖二。海馬中表達小清蛋白的中間神經元和表達GFAP的星形膠質細胞。
大鼠海馬染色HB6457檢測小清蛋白和HB6406去探測GFAP。使用抗小鼠生物素抗體(HB11345隨后用鏈霉親和素AF488 (HB13531)孵育。方法:將大鼠腦解剖并在4% PFA中固定過夜,然后在30%蔗糖(在PBS中)中孵育直到下沉(大約。48小時)。在切片在1% NaBH4中孵育30分鐘之前,使用冷凍切片機切割40 μm水平切片。切片在0.05M甘氨酸、2% BSA和3%驢血清中封閉,然后在小清蛋白中孵育過夜HB6457(1:1000稀釋)和GFAPHB6406隨后用1∶300稀釋度的二抗(山羊抗小鼠生物素化抗體HB11345,山羊抗雞647,Invitrogen)孵育2小時。在PBST洗滌三次后,切片用鏈霉親和素AF488孵育HB13531在室溫下以1.0升/毫升的濃度持續2小時。DAPIHB0747以1克/毫升的濃度使用以顯現細胞核。欲了解更多詳情,請參閱我們的IHC協議。使用徠卡DMI6000B倒置落射熒光顯微鏡捕獲圖像。使用z堆疊中的20x物鏡拍攝圖像,曝光時間:A4: 57.803毫秒,GFP: 151.803毫秒,Y5: 599.044毫秒
圖3。大鼠海馬中鏈霉親和素AF488的濃度反應。
鏈霉親和素AF488用于檢測大鼠海馬中表達小清蛋白的中間神經元。鏈霉親和素AF488 (HB13531)在低至1 g/ml的濃度下產生強染色。方法:將大鼠腦解剖并在4% PFA中固定過夜,然后在30%蔗糖(在PBS中)中孵育直到下沉(大約。48小時)。在切片在1% NaBH4中孵育30分鐘之前,使用冷凍切片機切割40 μm水平切片。切片在0.05M甘氨酸、2% BSA和3%驢血清中封閉,然后在小清蛋白中孵育過夜HB6457(1∶1000稀釋度)在4℃下。隨后用1∶300稀釋度的第二抗體(山羊抗小鼠生物素抗體)孵育2小時HB11345).在PBST洗滌三次后,切片與1.0 g/mL、5.0 g/mL和10.0 gL/mL的鏈霉親和素AF488 (HB13531)在室溫下孵育2小時。DAPIHB0747以1克/毫升的濃度使用以顯現細胞核。有關更多詳情,請參閱我們的href = "/免疫組織化學-ihc-protocol"> IHC(IF)方案。使用徠卡DMI6000B倒置落射熒光顯微鏡捕獲圖像。使用z型堆棧中的20x物鏡拍攝圖像,曝光時間為:
1.0克/毫升:A4: 57.803毫秒,GFP: 151.803毫秒
5.0克/毫升:A4: 71.225毫秒,GFP: 381.278毫秒
10.0克/毫升:A4: 71.225毫秒,GFP: 401.056毫秒
圖4:大鼠海馬中表達小白蛋白的中間神經元
大鼠海馬染色HB6457檢測表達小清蛋白的中間神經元。使用抗小鼠生物素抗體(HB11345隨后用鏈霉親和素AF488 (HB13531)孵育。方法:將大鼠腦解剖并在4% PFA中固定過夜,然后在30%蔗糖(在PBS中)中孵育直到下沉(大約。48小時)。在切片在1% NaBH4中孵育30分鐘之前,使用冷凍切片機切割40 μm水平切片。切片在0.05M甘氨酸、2% BSA和3%驢血清中封閉,然后在小清蛋白中孵育過夜HB6457(1∶1,000稀釋度)在4℃下。隨后用1∶300稀釋度的山羊抗小鼠生物素抗體與第二抗體孵育2小時HB11345).在PBST洗滌三次后,切片在室溫下用1.0 L/mL的鏈霉親和素AF488 (HB13531)孵育2小時。DAPIHB0747以1克/毫升的濃度使用以顯現細胞核。欲了解更多詳情,請參閱我們的IHC協議。使用徠卡DMI6000B倒置落射熒光顯微鏡捕獲圖像。使用z-stack中的20x物鏡以tilescan的形式拍攝圖像,曝光時間:A4: 57.803毫秒,GFP: 524.211毫秒,Y3: 524.211毫秒
光譜相似的染料 | Alexa Fluor 488,Atto 488,DyLight 488,FITC |
生物數據
應用筆記 | #方案1:在IHC檢測生物素標記的抗體 1.在NaBH中孵育自由漂浮的大鼠腦切片(40 m)4)15分鐘,然后在封閉緩沖液(0.05M甘氨酸、2% BSA和3%驢血清)中2小時。 2.將切片與封閉緩沖液中的一抗一起在4℃孵育過夜,如我們的IHC議定書。 3.在PBST清洗切片三次,每次5分鐘。 4.用2 g/mL山羊抗小鼠生物素抗體孵育切片HB11345或山羊抗兔抗體HB11036室溫下在封閉緩沖液中稀釋2小時 5.在PBST清洗切片三次,每次5分鐘。 6.在封閉緩沖液中用1 g/mL鏈霉親和素AF488孵育切片2小時。 7.在PBST清洗切片三次,每次5分鐘。 8.用10克/毫升DAPI孵育切片10分鐘。 9.在dH中清洗切片2o,用固定介質固定在載玻片上,并用蓋玻片覆蓋。 10.使用488nm激光或GFP濾光片激發鏈霉親和素AF488,在顯微鏡上對切片成像。 |
溶解性和處理
重構建議 | 我們建議用1毫升以下物質復原:- dH2O并儲存在4°C
- dH2O與甘油的比例為50∶50,并儲存在-20℃下
- 然后將dH2O等分并儲存在-80℃下
打開時要小心,因為沉淀物輕,如果受到干擾很容易丟失。重構時,在以< 10,000g的速度短暫旋轉鏈霉親和素之前,確保通過上下移液溶解鏈霉親和素,以確保所有材料都被回收并位于試管底部。 |
存儲器緩沖區 | 復溶時包含含0.05%die**鈉和1%重組牛血清白蛋白的PBS。 |
重要的 | 本產品僅供研究使用,不用于治療或診斷用途。不適用于人類或獸醫 |
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