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一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量測定試劑盒

簡要描述:一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量測定試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時(shí)間:2024-04-26
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詳細(xì)介紹

品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥

一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量測定試劑盒

注意:正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義:

NO(Nitric Oxide,NO)廣泛分布于生物體內(nèi)神經(jīng)、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿生殖等系統(tǒng)中,特別是神經(jīng)組織中較豐富。它作為細(xì)胞間及細(xì)胞內(nèi)的信息物質(zhì),發(fā)揮信號(hào)傳遞的作用,是一種新型的生物信使分子,在機(jī)體的生理、病理過程中起著重要的作用。

測定原理:

NO在體內(nèi)或水溶液中極易氧化生成NO2—,在酸性條件下,NO2—與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物,進(jìn)一步與萘基乙烯基二胺偶合,產(chǎn)物在550nm處有特征吸收峰,測定其吸光值,可以計(jì)算NO含量。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平、研缽或勻漿器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體6mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體6mL×1瓶,4℃避光保存。(用之前60℃加熱震蕩15min)

樣品處理:

  1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿。10000g,4℃離心15min,取上清,置冰上待測。

  2. 細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后10000g,4℃,離心15min,取上清置于冰上待測。

  3. 體液和培養(yǎng)液等其它液態(tài)樣品:直接測定。

測定步驟和操作表:

  1. 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至550nm。

  2. 操作表


空白管

測定管

樣品(μL)


100

提取液(μL)

100


試劑一(μL)

50

50

試劑二(μL)

50

50

混勻,室溫靜置15min,于微量石英比色皿/96孔板,測定A550,ΔA=A測定-A空白

NO含量計(jì)算:

  1. 用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為:y= 0.016x -0.0103,R2= 0. 9986

1、組織樣品:

(1)按樣本質(zhì)量計(jì)算

NO含量(μmoL/g 鮮重)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反總÷(V樣÷V樣總×W)×10-3

= 0.125×(ΔA +0.0103)÷W

(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算

NO含量(μmoL/mg prot)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反總÷(V樣×Cpr)×10-3

= 0.125×(ΔA +0.0103)÷Cpr

2、細(xì)胞:

NO含量(μmol/104 cell)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)×10-3

= 0.125×(ΔA +0.0103)÷細(xì)胞數(shù)量(萬個(gè))

3、其他樣品:

NO含量(μmoL/L)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反總÷V樣

= 125×(ΔA +0.0103)

V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)中樣品體積,0.1mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:蛋白濃度,mg/mL

  1. 用96孔板測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為:y= 0.008x - 0.0103,R2= 0. 9986

1、組織樣品:

(1)按樣本重量計(jì)算

NO含量(μmoL/g 鮮重)=(ΔA +0.0103)÷0.008×V反總÷(V樣÷V樣總×W)×10-3

= 0.25×(ΔA +0.0103)÷W

(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算

NO含量(μmoL/mg prot)=(ΔA +0.0103)÷0.008×V反總÷(V樣×Cpr)×10-3

= 0.25×(ΔA +0.0103)÷ Cpr

2、細(xì)胞:

NO含量(μmol/104 cell)=(ΔA +0.0103)÷0.008×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)×10-3

= 0.25×(ΔA +0.0103)÷細(xì)胞數(shù)量(萬個(gè))

  1. 其他樣品:

NO含量(μmoL/L)=(ΔA +0.0103)÷0.008× V反總÷V樣= 250×(ΔA +0.0103)

V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)中樣品體積,0.1mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:蛋白濃度,mg/mL


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  1. 國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

  2. 國外試劑的訂購。可提供歐美實(shí)驗(yàn)室品牌的采購方案。

  3. 提供加急物流處理,進(jìn)口貨物,最快交期1-2周。

  4. 進(jìn)出口貨物代理服務(wù)。

  5. 公司代理眾多有名生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點(diǎn)合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

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  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運(yùn)作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。

一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量測定試劑盒


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