抗酸微生物通常是在尋找結核病和其他呼吸道疾病或其他分枝桿菌感染時發現的。這些高度傳染性的細菌需要特殊的個人防護設備,并且通常需要特殊的規程來確保實驗室技術人員或其他標本不會被污染。
抗酸微生物的細胞壁對常規染色有抵抗力。抗酸染色劑努力促進染料的吸收。一旦染色,這些微生物不容易脫色(即使用酒精或酸性丙酮溶液)。這就是它們被稱為“抗酸"的原因
石炭酸品紅被用作抗酸生物的主要染料,因為它在細胞壁脂質中比在酸性醇中更易溶解,所以生物將保留染料的紅色。脫色劑用于從任何非抗酸生物中去除染料,使這種生物易于從抗酸生物中分離和識別。
抗酸微生物的常見問題是,微生物不能保留染色或不能正確染色。因此,這種微生物可能很少或沒有紅色。
如果抗酸細菌沒有像預期的那樣保留染料,則執行改良的Kinyoun染色方案。與澤赫爾-尼爾森染色法相比,這種方法使用硫酸代替鹽酸,從而使染色的抗酸能力更弱。
- 用金永的石炭酸品紅淹沒載玻片5分鐘。
- 用50%乙醇短暫沖洗載玻片(3-5秒)。
- 用1%硫酸脫色2分鐘,或直到載玻片上不再有顏色。
- 用水沖洗載玻片,然后瀝干。
- 用亞甲藍或亮綠復染1-3分鐘。
- 用水沖洗,然后風干。
弱酸性抗酸染色應該對脫色后不能保留石炭酸品紅的生物進行染色。