生物綴合物是指一個分子通常通過共價鍵連接到另一個分子上,以形成由兩個連接在一起的分子組成的復合物。生物共軛技術在開發針對特定目標的衍生蛋白質、DNA、RNA和碳水化合物的新型研究方面具有廣泛的應用,例如配體發現、疾病診斷和高效篩選。這是一個具有廣闊前景的研究領域。
生物共軛是兩個生物分子共價鍵合的過程。常見的生化偶聯包括賴氨酸氨基酸殘基的胺偶聯、半胱氨酸殘基的硫氫基偶聯,以及常常由光化學引發的自由基反應。生物共軛的產物是生物共軛物。
最常見的生物偶聯是小分子的偶聯,例如生物素與蛋白質的偶聯;以及蛋白質與蛋白質的偶聯,例如抗體與酶的偶聯。其他不常見的偶聯分子,如寡糖、核酸、合成聚合物:聚乙二醇、碳納米管。生物綴合物包括抗體-藥物復合物 (ADC)、聚乙二醇化蛋白、siRNA 復合物和疫苗復合物。
小分子屬于半抗原,僅具有反應性但不具有免疫原性。它們只有與載體(通常是蛋白質,也有多肽)偶聯形成完整抗原后才具有免疫原性,進入動物體內后才會產生抗體。 。載體蛋白是能夠自行引發免疫反應的大分子。許多不同類型的載體蛋白可以與小分子綴合以制備完整抗原。常用的載體包括牛血清白蛋白、匙孔血藍蛋白、卵清蛋白、牛甲狀腺球蛋白等。載體蛋白的選擇主要涉及其溶解度、大小、偶聯基團、免疫原性、成本等因素。目前市場上應用廣泛的牛血清白蛋白BSA主要是由于BSA化學性質穩定,不易變性,分子中含有多種氨基,且賴氨酸含量高,廉價易得。但 BSA 限制了其在一些免疫測定實驗中作為封閉劑的用途。第二個選擇是匙孔血藍蛋白KLH和卵清蛋白OVA。
1、對于帶有羧基或氨基的化合物,采用碳二亞胺法和混合酸酐法;
2、含有巰基的化合物,采用馬來酰亞胺法;
3、對于分子結構中帶有氨基的化合物,戊二醛法是常用的方法。
1.生化評估:
綴合小分子可用作嚴格生化分析的探針,生物素等非熒光小分子也可用作機械探針。
2.診斷應用:
臨床樣本的定性和定量分析對于早期疾病診斷至關重要,抗體-抗原相互作用的高特異性避免了樣本純化,可廣泛應用。
3、工業應用:
生物共軛可用于很多行業,可以用于食品行業,如異構化富馬酸和蘋果酸,用于食品殘留檢測;醫藥工業利用固定化酶進行藥物合成,也可用于藥物檢測。代理檢測等